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产品型号：CS-800，50 Pack
产品代码：
产品价格：
折 扣 率： 0
最后更新：2017-06-12
关 注 度：3314
生产企业：深圳市国泰宜丰科技有限公司
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产品详细介绍
蛋白质纯化试剂盒--Pro·SpinTM
Pro·SpinTM 离心柱的设计以去除标记抗体中游离的荧光染料、半抗原和载色体等为目的，有利于缓冲交换和脱盐。（请参照“综合启示”一节中有关其它类型蛋白纯化的补充说明） 纯化单元由
（1）一个特殊的含有凝胶过滤介质的多空微量离心管，
（2）清洗管，
（3）样品收集管组成。
使用缓冲液水化离心柱介质（参照第二步有关水化缓冲液注解）。在微量离心机中离心去除多余的液体。将抗体样品上样在离心柱上，再次离心，回收纯化的标记抗体。
Pro· SpinTM 离心柱具有下列优良特性：
1 多样 去除染料、半抗原或盐
2 高效 标记抗体的回收率大于90%
3 简单 仅需要一个台式离心机
4 快速 仅两次2分钟的离心步骤
5 可靠 一致的结果
6 方便 室温储存稳定长久的保质期
1 mg 标记抗体纯化方法
1. 每一个离心柱可容纳样品近100uL，如果样品体积大于100 uL，则将样品分成份，每份使用不同的离心柱进行纯化。
2. 轻轻敲击离心柱以确保干胶沉到离心管底部，打开离心管顶盖，加入650 uL水化缓冲液。水化缓冲液
注意事项：
用PBS缓冲液水化离心柱。除了PBS之外，其它缓冲液也可使用，但有可能使非特异性抗体通过离子的或 疏水性相互作用与离心柱结合。这些相互作用会影响标记抗体从离心柱中的回收。
3. 盖上顶盖，剧烈震荡5秒钟，短促敲击离心管底部去除气泡。离心柱使用之前，至少水化30分钟。
离心柱水化注意事项： 使所有干胶都水化是非常重要的。.
4. 水化30分钟之后，打开离心柱顶盖，拿掉离心柱底部的塞子。
离心柱储存注意事项：
水化的离心柱可以在4°C储存几天。补充10 mM叠氮化纳可以储存更长时间。使用之前将离心柱恢复到室温。
5. 使用可变速离心机，在750 x g下，将离心柱同清洗管一起离心2分钟，以便去除多余的液体。
固定角微量离心注意事项：
如果使用固定角微量离心，将定位标记模子放入到离心柱中，以便保持追踪离心柱的位置。准确离心速度的计算
使用水平式转子或吊桶式转子可以得到最高的产量。然而，固定角转子微量离心也可以得到满意的结果，并且省时。 对于可变速微量离心，不要使用按压式按钮，因为转速会超过设定而使转子以最大的离心力运行。如果不能确定在设置的离心速度上所产生的重力，则使用下面的公式计算出正确的速度：
在这里：
rpm = 每分钟转
RCF= 相对离心力
r = 半径，是从转杆中心到转子桶底部的距离
6. 用纸吸掉离心柱末端小滴液体，弃去清洗管和多余液体。不要使凝胶过分干燥。即刻进行样品处理。结合抗
体的纯化
7. 将离心柱拿到明亮处，取出约100 uL样品（参见步骤1），加到每个离心柱的顶端。
离心柱上样注意事：
仔细地将样品直接地加入到凝胶床顶端的中心位置，不要搅动凝胶的表面。不要用反应混合物或样
品吸管的头触及离心柱的侧壁，因为这会降低纯化的效率。
8. 将各个离心柱放到收集管中，再将二者放到转子中，保持固定的离心柱方向。
离心柱定位注意事项
离心柱中凝胶介质的最高点应该总是朝向转子的外侧。
9. 750 x g，离心2分钟，纯化的抗体结合物将被收集到收集管的底部。
10. 弃去离心柱
11. 在合适的条件下储存纯化的抗体
标记抗体的回收
通过表面荧光图象和考马斯亮兰染色的SDS变性凝胶电泳的检测得知，使用PBS水化缓冲液水化离心柱，可以回收90%多的荧光素标记抗体。
材料供给 50个Pro•Spin 离心柱；50 只清洗管；50 只样品收集管
推荐附加材料
微量离心机；移液器（枪）；枪头；微量离心管架；震荡器
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标记蛋白纯化综合启示
除了抗体之外，使用 Pro•Spin 离心柱也可以从蛋白中去除染料、半抗原、载色体和盐。然而，由于蛋白与离心柱基质特异性或非特异性的相互作用，使蛋白的回收率降低。下表中列出了常见的相互作用模式，并给出了解决的方法。
问题 解决方法
与离心柱基质的疏水性相互作用 加入非离子型变性剂，减少离子强度或增加水化缓冲液pH
与离心柱基质的离子型相互作用 增加水化缓冲液的离子强度
样品沉淀 增加离子强度，去除水化缓冲液中的盐或稀释样品
样品的蛋白酶降解 在水化缓冲液中加入合适的蛋白酶抑制剂
问题 解决方法
与离心柱基质的疏水性相互作用 加入非离子型变性剂，减少离子强度或增加水化缓冲液pH
与离心柱基质的离子型相互作用 增加水化缓冲液的离子强度
样品沉淀 增加离子强度，去除水化缓冲液中的盐或稀释样品
样品的蛋白酶降解 在水化缓冲液中加入合适的蛋白酶抑制剂
Pro·Spin 和 Fluoro·Spin 是Princeton Separations 有限公司的产品商标。NIRD (Near Infrared Dye近红外线染料) 是EMP Biotech GmbH公司的产品商标。 NIRDS 由Dyomics 生产。
订货信息：
目录号 规格
CS-800 50pack
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| 会员级别：免费会员 |
| 加入时间：2017-01-11
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