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产品型号：EN-130, 3 x 5 ug
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折 扣 率： 0
最后更新：2017-06-12
关 注 度：3748
生产企业：深圳市国泰宜丰科技有限公司
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产品详细介绍修饰Lysine-C（赖氨酸肽链内切酶）测序级
来自于产酶溶杆菌的Lysine-C肽链内切酶是一种苏氨酸蛋白酶，它高度特异性地裂解赖氨酸羧基端肽键。
Princeton Separations公司测序级肽链内切酶是高度纯化的酶，通过化学修饰，降低了酶的自裂解，增加了酶的稳定性。由于在超的长消化期间酶持续保持活性，因此可以极好地控制蛋白裂解反应。
特性
来自于产酶溶杆菌的Lysine-C肽链内切酶是一种苏氨酸蛋白酶，它高度特异性地裂解赖氨酸羧基端肽键。
化学修饰
使用Princeton Separations开发的一种方法将高纯度酶制品进行化学修饰。这种修饰使酶呈现出自分解抗性和稳定的酶活性。该修饰酶在30°C反应缓冲液中孵育6小时，其仍能保持至少90%的酶活性，在同样条件下孵育24小时，仍保持65%的活性 ,并仍保留对赖氨酸的特异性。
质量控制
我们公司对测序级Lysine-C肽链内切酶与测序应用相关的质量进行鉴定。两种方法控制质量：一种是酰胺酶法；另一种是蛋白酶（消化）法，两种方法都以酪蛋白为底物。以胰蛋白酶作为对照，同时消化酪蛋白，然后两者进行比较，计算出Lysine-C肽链内切酶与胰蛋白酶活性等价的值。使用合成肽阵列检测酶的特异性。
制备
每只小瓶装有Lysine-C内切蛋白酶干粉5μg，用20μl去离子水或反缓冲液溶解，使蛋白酶浓度为0.25μg/μl
应用
将酶与蛋白以1：20或1：100比值（W/W）混合于标准的消化缓冲液如50mM 碳酸氢铵, pH 7.8 - 8.0。一般25-30°C，孵育1-10小时，在某些情况下可以延长到24小时。根据被蛋白的性质确定孵育时间。通过调整酶与样品的比率可得到最佳孵育时间。需要指出的是Lysine-C的消化活性仅为胰蛋白酶的40%。
储存
溶解的酶应冷冻储存于-10 to - 20°C。
在变性中的稳定性
在蛋白难于溶解的情况下，则在消化之前将变性剂如尿素或盐酸胍加入到蛋白混合液中。下表中所例举的数据显示变性剂对修饰 Lysine-C活性的影响。
变性剂 浓度 活性控制%
对照 — 100%
尿素 0.50M 100%
尿素 1.00M 100%
尿素 2.00M 100%
盐酸胍 0.10M 100%
盐酸胍 0.25M 80%
盐酸胍 0.50M 30%
盐酸胍 1.00M 10%
References
Jackson, R. L.., and Wolfe, R. S., J. Biological Chemistry 243, 879 (1968)
订货信息：
产品目录 产品说明
EN-130 Lysine-C 3 x 5 ug vials
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| 加入时间：2017-01-11
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